注意！无创产前基因检查并非万能

      无创产前基因检测（CNV）是通过采集孕妇外周血，提取游离 DNA，采用新一代高通量测序技术，结合生物信息分析，得出胎儿患染色体非整倍体的风险（21- 三体，18- 三体，13- 三体）。该方法具有无创取样、无流产风险、高灵敏度，准确性高的特点，现在已经在很多国家被广泛采用。

       传统的产前检查包括无创的血清学筛查和有创的羊膜腔穿刺。前者测得非整倍体的风险值，达到高危者进行后者。就我国来说目前血清学筛查的假阳性率为 5%，而检出率为 70% 左右。羊膜腔穿刺结果是金标准，但其最大的问题是有一定的致流产率。

      近期来自美国华盛顿大学，基因科学系的 Snyder 教授发表在 NEMJ 的文章对 CNV 的假阳性原因进行了研究。

      要理解 CNV 的假阳性的原因，首先要了解 CNV 的原理。人的血液中存在很多游离于细胞之外的 DNA（cfDNA），对于孕妇来说，大部分来自母体，小部分来自胎盘，也就是胎儿的 DNA。

      这些游离 DNA 都是以小片段存在的，长度比较固定，因为它们都是围绕在核糖体上经过酶切得到的。通过第二代高通量测序技术测得每个片段的序列，分析其来自哪条染色体，分类后得到每条染色体的 DNA 量，与标准 DNA 量比较后得到相对量。一般来说母体的染色体均为二倍体，相对量的数量应近乎一致，如果某条染色体的数量超出正常，提示胎儿此条染色体为三倍体。统计方法使用 z-scores 法。

      由此可知，影响游离 DNA 数量的情况都可以导致假阳性，如肿瘤、双胞胎消失综合征、限制性胎盘嵌合体及技术原因等。本文主要探讨的是母系拷贝数变异，如果母亲某染色体上的一个区域出现拷贝数增加，将导致此条染色体 cfDNA 数量增加。

      研究人员随机选出了 4 位经证实的 CNV 假阳性患者，结果其中 2 位诊断为 18- 三体的患者存在 18 号染色体拷贝数变异。研究者分析了拷贝数变异对假阳性的具体影响，得出结论：变异的片段越大，对结果影响越大，整条染色体的变异系数越大，越会稀释拷贝数变异的影响。如果对 CNV 阳性者进行母系拷贝数变异的检测，也许可以通过数据处理矫正母系拷贝数变异的影响，使假阳性率降低。

      CNV 作为无创检查在精确度上完全超越血清学筛查，已经在高危人群中广泛使用，且已经有研究显示其在低危人群中也有很高的应用价值。有研究表明其在低危人群中预测第 21 对、18 对和 13 对染色体出现 3 体变异的假阳性率分别为 0.3%、0.2%、0.1%。

      但其阳性预测值在第 18 和 21 对中分别只有 40% 和 45.5%，因为非整倍体本身发病率非常低。这样，对于 CNV 阳性者就必须进行后续的 B 超检查或有创检查。为了进一步提高 CNV 的阳性预测值，需要降低 CNV 的假阳性率。目前我国已经允许 CNV 应用于对 21- 三体的检测，随着技术的发展，相信 CNV 可以取代羊膜穿刺成为普遍应用的金标准。